1/1/2022 - 31/12/2023
Este proyecto tiene como objetivo general alcanzar un mejor perfil farmacoterapéutico en los tratamientos de la epilepsia, a partir del diseño racional de nuevos compuestos anticonvulsivos (FAEs, fármacos antiepilépticos). Específicamente proponemos centrarnos sobre la modulación de los canales de sodio operados por voltaje (NaV), dado que su bloqueo ha demostrado ser una herramienta efectiva para el tratamiento de la epilepsia. Teniendo en cuenta que en los distintos tipos celulares del organismo se expresan distintas isoformas de los canales NaV, la posibilidad de encontrar compuestos que bloqueen selectivamente aquellas isoformas expresadas a nivel neuronal constituye una estrategia para prevenir la aparición de efectos secundarios derivados del bloqueo de canales NaV sobre otros tipos celulares. El plan de trabajo tiene como objetivo específico inicial la utilización de los modelos estructurales de los canales NaV1.2 (neuronal) y NaV1.5 (cardiaco), como estructuras target y anti-target, respectivamente, en la predicción in silico de nuevos fármacos anticonvulsivos. Serán utilizados para el tamizado virtual sobre una base de datos propia, construida a partir de un conjunto de compuestos con perfil farmacológico in vivo conocido. Disponemos de una biblioteca virtual formada por 45 derivados de sulfamidas y sulfamatos evaluados hasta la actualidad de una serie de estructuras con un perfil farmacológico similar a fenitoína: activos frente a MES test e inactivos frente a PTZ test.Mediante ensayos biológicos a partir la técnica de patch clamp, nos proponemos: (a) validar los modelos computacionales, (b) evaluar el efecto sobre la corriente de sodio a través de los canales NaV y (c) determinar el mecanismo de acción de los FAEs seleccionados. La técnica de patch clamp permitirá comprobar experimentalmente las predicciones a nivel molecular realizadas sobre los canales NaV. Para estos objetivos se utilizarán dos líneas celulares, derivadas de la línea celular HEK293 (Human Embrionyc Kydney), que expresan en forma estable las subunidades alfa, formadora del poro de los canales NaV1.2 y NaV1.5 humanos.